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新品上市丨博奧森人外周血淋巴細胞分離液,一步離心 高效提取-北京博奧森生物技術有限公司
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新品上市丨博奧森人外周血淋巴細胞分離液,一步離心 高效提取
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2023-3-27


產品介紹

產品名稱 Lymphocyte Separation Medium (Human)
產品貨號
CS102
產品規格
200ml
200ml×20


產品優勢

1.凈:無菌,無支原體,低內毒素,再也不用擔心細胞污染啦;

2.簡:即用型,步驟簡單,用時少,一步離心,淋巴細胞輕松get;

3.晰:分離條帶清晰,“白膜層”明顯,手殘黨使用也能so easy;

4.高:分離的淋巴細胞活力好,利于后續實驗使用;

5.純:分離的淋巴細胞純度大于90%,紅細胞、粒細胞等雜細胞少,沒有分散的細胞團塊,減少雜質干擾,使檢測結果更準確;

6.廣:可以用來分離人的淋巴細胞和單核細胞,外周血、骨髓、臍帶血等多種血液樣本全覆蓋;

7.廉:低廉的價格,優秀的品質,帶來更高性價比。


老師,Ficoll分離人外周血單個核細胞的原理是什么???

外周血單個核細胞 (Peripheral blood mononuclear cell,PBMC是外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞、單核細胞和樹突狀細胞,其中淋巴細胞占70%-80%,單核細胞占10-30%,樹突狀細胞占1-2%。

Ficoll根據血細胞的密度差異,通過離心使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,從而將淋巴細胞從人外周血或臍帶血中分離出來。單個核細胞的體積、形狀和比重與其他細胞不同,紅細胞和多核白細胞比重較大,為1.092左右,淋巴細胞和單個核細胞比重為1.075左右。


原來是這樣,那用Ficoll進行人外周血中淋巴細胞分離時,各層分布的細胞我也不太明白,可以講解一下嘛?

很簡單,記住下面這張圖就可以了,在利用Ficoll作密度梯度離心時,各種血液成分將按密度梯度重新分布聚集:血漿和血小板密度較低,懸浮于分離液的上部;紅細胞與粒細胞密度較大,沉于分離液的底部;PBMC 密度稍低于分離液,位于分離液界面之上。因此從管底往上依次為:紅細胞-Ficoll細胞分離液-淋巴細胞-血漿。一般要先小心地將上層的血漿和血小板移除后再吸取淋巴細胞。


這么看就清晰多啦,可是我的離心結果中出現了血小板污染,這是為什么呢?

很多情況都可以導致血小板污染,可以從以下幾個方面對實驗操作進行優化:

1.血液樣本最好為新鮮抗凝血(采血2 h以內);

2.離心溫度控制在18~20℃;

3.取目的層樣品時,需先將上層溶液去掉,再吸取目的層;

4.分離后進行洗滌時,可以在較低的離心力情況下進行離心處理,血小板密度比較低,會留在血漿中,PBMC在沉淀里,通過這一操作可以除掉一部分血小板;

5.吸取過多的血漿層也可能會導致淋巴細胞中血漿蛋白及血小板污染。


我明白了,那紅細胞污染又是什么原因呢?

出現紅細胞污染的原因比較簡單,可能是由于以下幾個問題:

1.溫度太低。低溫使Ficoll密度變大,從而導致紅細胞粒細胞在最底層聚集效果不佳,進入上邊的PBMC層;

2.離心速度太慢、離心時間太短,各層分布的細胞沒有得到完全沉淀,應該根據結果摸索更適宜的離心條件。


老師你在分離人外周血單個核細胞的時候還有什么經驗,快把秘訣分享給我!

那我可得好好和你聊聊了!

1.分離結果為何出現淋巴細胞產量低、活力低且出現其它類型細胞污染的情況?

可能是由于溫度過高,使Ficoll密度變小,PBMC進入分離液層,回收的PBMC數量減少。也可能是由于血液樣本放置過長,或是血液樣本保存和運輸途中條件不當等原因。

2.分離結果為何出現淋巴細胞產量低但活力正常的情況?

在分離時,未用全血及組織稀釋液或者PBS將血液稀釋到1:1,通常情況下,紅細胞比容較高,高細胞密度會導致大量的淋巴細胞陷入聚集的紅細胞團塊中,此時應進一步稀釋血液樣品,提高單核細胞產量并減小紅細胞團塊的體積。

3.分離結果為何出現淋巴細胞低產量且粒細胞污染增加的情況?

可能是由于離心機轉子振動,導致淋巴細胞帶的增寬,與下層細胞混合。應先檢查轉子是否已平衡,再選擇合適的轉速,以避免自發共振頻率。


謝謝老師,秘訣我都記好啦,那你有沒有什么產品推薦呢?

當然啦,Bioss全新推出的人外周血淋巴細胞分離液,是一種無菌、低內毒素水平的密度梯度分離液,能夠有效分離人外周血淋巴細胞,并且保證分離的淋巴細胞活率,無菌條件下所分離的細胞可用于免疫學檢測。 有了它你的細胞分離一定可以事半功倍!

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